RNA pull down實驗技術

1. 實驗原理

RNA pull down是體外研究RNA與蛋白互作的重要技術。該技術是用生物素標記體外轉(zhuǎn)錄的靶RNA分子，再用鏈霉親和素純化出與靶RNA結合的蛋白復合體，洗脫得到RNA結合蛋白質(zhì)。再通過western blot實驗檢測特定的RNA結合蛋白是否與靶RNA結合；或通過質(zhì)譜儀檢測可以篩選出與靶RNA結合的蛋白。

生物素與鏈霉親和素間的作用是目前已知強度最高的非共價作用；其中活化生物素可以在蛋白質(zhì)交聯(lián)劑的介導下，與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián)。因此用生物素標記核酸后，可以純化出與該核酸結合的各種生物大分子復合物。

2. 實驗流程

1）探針設計及標記：體外轉(zhuǎn)錄或合成獲取RNA，生物素標記;

2）pull down：與細胞裂解液孵育，形成RNA-蛋白質(zhì)復合物。該復合物可與鏈霉親和素磁珠結合，從而把靶RNA結合蛋白從細胞裂解液中分離出來，經(jīng)過洗滌將非特異性結合蛋白質(zhì)去除；最后，洗脫得到與靶RNA結合的蛋白質(zhì)復合物；

3）互作蛋白質(zhì)鑒定：再經(jīng)過Western Blot（WB）或質(zhì)譜(MS)鑒定蛋白質(zhì)。

3. 服務內(nèi)容

1）體外轉(zhuǎn)錄或合成RNA，生物素標記；

2）細胞培養(yǎng)與細胞裂解液制備；

3）pull down捕獲互作蛋白；

4）Western blot驗證互作蛋白；

5）MS篩選鑒定互作蛋白。

4. 交付結果

1）提供詳細、完整的實驗報告；

2）客觀公正的原始數(shù)據(jù)和實驗分析結果。

更多細胞實驗技術

細胞低氧培養(yǎng)模型

原代細胞分離與培養(yǎng)

小管形成實驗

單克隆形成實驗

細胞增殖/毒性檢測

細胞遷移/侵襲實驗

TUNEL法細胞凋亡檢測

流式法細胞凋亡檢測

細胞衰老檢測

細胞免疫熒光觀察

......

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專注于生命科學領域提供相關試劑產(chǎn)品和服務的生物高科技企業(yè)，坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類齊全的細胞系和多種原代細胞、質(zhì)量穩(wěn)定的細胞培養(yǎng)試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術服務。本著“守正創(chuàng)新，科學嚴謹"的理念，我們以高標準塑造行業(yè)品牌，以全新視野構建現(xiàn)代企業(yè)，勇于探索和創(chuàng)新。公司業(yè)務范圍涉及全國各省市自治區(qū)，與國內(nèi)多家醫(yī)院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關系，贏得了良好的市場聲譽和廣泛的認可，我們保證將繼續(xù)為廣大科研用戶提供專業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務！

細胞系(帶STR鑒定) | 原代細胞 | 細胞培養(yǎng)基 | 血清 | 細胞培養(yǎng)添加因子 | 標記細胞 | 耐藥細胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實驗 | RIP 實驗 | ChIP實驗 | Co-IP實驗 | 質(zhì)譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細胞培養(yǎng)/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測  等。更多信息，歡迎垂詢上海昆盟生物科技有限公司。